符咒72图:【评测】3D细胞培养耗材

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尽管标准的2D或单层细胞培养对于现代生物学的发展至关重要，但3D细胞培养在细胞行为和药物反应方面体现的显著优势使得人们对3D细胞培养越来越感兴趣符咒72图。3D细胞培养技术的普及也让人们认识到它在优化和分析方面的挑战，这里，我们讨论这些困难，并提出一些有效的解决方案。

细胞球的形成

我们知晓，不是所有的细胞都容易形成完美紧实的细胞球，但是，有一些技巧或技术可以帮助细胞球的形成符咒72图。具体来讲，优化细胞的铺板密度，培养基的配方，培养时间或使用Greiner Bioone的磁性3D培养技术有助于细胞球的形成。细胞排斥表面培养板有效阻止细胞贴壁，磁性纳米粒子（Nanoshuttle）与成球磁力架共同作用，促进细胞球自发形成。

细胞球的尺寸

细胞球的大小与细胞类型，细胞铺板密度和培养时间等密切相关符咒72图。当细胞球越大，营养物质和氧气将更难到达细胞球中心，这可能是理想结果也可能是不理想的，根据您的实验而定。优化初始细胞接种密度对细胞球的形成有着至关重要的作用。

初始细胞接种密度对细胞球的大小有关键影响符咒72图。不一样铺板密度形成尺寸不一的细胞球，通常情况下，铺板密度越大，形成的细胞球越大。

图1：不一样密度的A549细胞培养48小时后形成的细胞球符咒72图。比例尺 = 500 μm

细胞成球时间

有些种类的细胞容易形成细胞球，可能在数小时内形成球状体，而其他细胞则需要几天符咒72图。随着时间的推移监测细胞球的形成将有助于确定每种应用的理想培养期。

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图2：Hela细胞24小时内成球过程

图3：HT29细胞72小时内成球过程

细胞球处理

换液

细胞球在培养容器中通常不是完全静止的，也不会贴在孔板底部或板壁，这大大增加了换液难度，对此，Greiner Bioone的换液磁力架（holding drive）大大便利了这一操作符咒72图。以96孔细胞球生物打印套装（货号：655840）为例，换液磁力架上的一个磁柱以磁性作用吸引96孔板上4个孔中的细胞球，这使得换液变得十分轻松。

图4：红色箭头所示为96孔板适配的换液磁力架（holding drive）

细胞球转移

有时，由于实验需求，需要将细胞球转移到其他环境中继续培养，做后续实验分析符咒72图。通常，实验人员直接用吸头吸出细胞球，这不仅容易破坏细胞球结构还不可避免地会吸出培养基，影响后续实验。Greiner Bioone的MagPen系列产品轻松解决了这一问题。MagPen（货号657850）可用于转移单个细胞球，MulMagPen可用于转移整板的细胞球。

图5：用于转移单个细胞球的MagPen

图6：24孔MulMagPen（左）和96孔MulMagPen（右）

本文仅对3D细胞培养成球的一些影响因素和培养过程中的操作技术方面做了一些总结，对于后续细胞球的分析我们还有哪些大招呢，敬请关注Greiner生命科学的后续推送符咒72图。

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参考文献

[1] Hou, Shurong, Tiriac, et al. Advanced Development of Primary Pancreatic Organoid Tumor Models for HighThroughput Phenotypic Drug Screening[J]. SLAS Discovery Advancing Life Sciences R D, 2018.

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